Диагностика оппортунистических микозов
Оппортунистические микозы (ОМ), вызываемые потенциально патогенными грибами на фоне снижения резистености организма, представляют острую проблему в современной ветеринарной микологии. Заболеваемость животных микозами этой группы в последние годы значительно возросла, в то время как диагностика оппортунистических микозов в ветеринарии находится на недопустимо низком уровне.
Учитывая относительную новизну данной проблемы, такая ситуация вполне объяснима. В представлении большинства ветеринаров (как практикующих, так и лабораторных), грибы-оппортунисты остаются безвредными сапротрофами и контаминантами, не представляющими опасности для здоровья животных. Значение в повседневной практике, как правило, придаётся лишь дерматофитам и грибам родов Aspergillus и Candida. Часто в лабораторных заключениях встречаются формулировки «дерматофиты не обнаружены» или «грибы рода Candida не обнаружены», что не позволяет врачу оценить истинную картину патологического процесса. Низкий уровень осведомленности о других возбудителях микозов ведёт к диагностическим ошибкам и неадекватной терапии.
Основные отличительные особенности диагностики оппортунистических микозов по сравнению с «классическими» микозами (дерматофитозами):
— отсутствие «золотого стандарта» диагностики оппортунистических микозов;
— значительно более разнообразный видовой состав возбудителей;
— разнообразие клинических проявлений, отсутствие характерных клинических признаков;
— более широкий спектр восприимчивых животных, в т.ч. холоднокровных;
— в ряде случаев – необходимость в специальных условиях отбора проб патматериала и их хранения;
— неэффективность люминесцентного метода диагностики;
— необходимость параллельного использования нескольких питательных сред, с учетом физиологических особенностей возбудителей;
— необходимо не только обнаружить гриб, но и правильно интерпретировать его этиологическую значимость;
Сама процедура диагностики оппортунистических микозов еще недостаточно разработана, отсутствует «золотой стандарт» для этих целей. Принципы, используемые в диагностике классических микозов (дерматофитозов), не позволяют диагностировать оппортунистические микозы, что, на наш взгляд, является основным фактором низкой выявляемости этих заболеваний у животных.
Видовой состав возбудителей оппортунистических микозов, по сравнению с дерматофитозами, гораздо более разнообразен, и включает представителей различных систематических групп. Этиологическое разнообразие обуславливает разнообразие клинических проявлений оппортунистических микозов, отсутствие характерной клинической картины, как в случае дерматофитозов. При оппортунистических микозах практически отсутствует видоспецифичность в отношении животного-хозяина. Помимо млекопитающих, грибы-оппортунисты поражают также птиц и холоднокровных животных (рептилий), в последние годы завоевывающих популярность в качестве домашних питомцев. Отсутствие клинических предикторов и видоспецифичности существенно затрудняет диагностику оппортунистических микозов.
Лабораторная диагностика микозов в повседневной практике как правило включает люминесцентное обследование с помощью лампы Вуда, микроскопию патологического материала, и существенно реже – посев на селективные среды для выделения дерматофитов. Грибы-оппортунисты в большинстве случаев не вызывают люминесценцию пораженных тканей, и не всегда могут быть обнаружены при микроскопии. Если дерматофиты образуют в пораженных тканях характерные артроспоры, легко заметные при микроскопии, то различные виды грибов-оппортунистов по-разному представлены в патологическом материале. «Атипичные» элементы грибов-оппортунистов часто остаются необнаруженными, или неправильно интерпретированными. Таким образом, при микроскопии необходимо обращать внимание не только на наличие артроспор, но и на другие грибные элементы, которые могут быть представленны гифами мицелия, спорами различного строения, дрожжевыми клетками. При этом обнаружение редких единичных грибных элементов (спор или фрагментов мицелия) как правило не имеет диагностического значения.
Культуральное микологическое исследование в повседневной ветеринарной практике ориентировано на обнаружение грибов-дерматофитов, для чего используются селективные питательные среды или добавки, ингибирующие рост других микроорганизмов (в т.ч. и грибов-оппортунистов). Такой подход к микологическому исследованию часто приносит ложно-отрицательные результаты. Для полноценного микологического исследования необходимо использовать параллельно несколько питательных сред различного назначения – среду для выделения дерматофитов, среду с антибактериальными добавками и микологическую среду без селективных добавок. Такой набор сред позволяет получить наиболее объективное представление о микобиоте исследуемого материала и обнаружить этиологически значимые микроорганизмы.
Следует принимать во внимание, что некоторые возбудители оппортунистических микозов имеют специфические питательные потребности. Так, грибы рода Malassezia для роста нуждаются в источнике липидов, и не могут быть выделены на обычных микологических средах (за исключением вида M. pachydermatis). При подозрении на Malassezia-инфекцию набор питательных сред должен быть дополнен липид-содержащей средой. Более подробно алгоритм диагностики Malassezia-инфекций животных изложен в работе П.П. Ершова (2008).
Важнейший этап диагностики оппортунистических микозов – интерпретация этиологической значимости гриба-оппортуниста, определение его роли в патологическом процессе. Выделение культуры недерматофитного мицелиального или дрожжевого гриба не может служить основанием для постановки диагноза, в то время как при дерматофитозах выделение дерматофита является бесспорным диагностическим критерием. Наиболее значимым критерием при диагностике ОМ является сопоставление результатов микроскопии и культурального анализа: если выделенный гриб проявляет морфологическое сходство с грибными элементами, обнаруженными при микроскопии пораженных тканей, это даёт основание подтвердить его этиологическую роль (в том случае, если не были обнаружены грибы-дерматофиты). Целесообразно выяснить в литературных источниках, описан ли данный вид гриба в качестве возбудителя оппортунистических микозов человека и животных. Это поможет окончательно интерпретировать результаты исследования.
Идентификация возбудителей ОМ осложняется их широким видовым разнообразием, требует от микологов большого практического опыта, наличия современных микологических определителей, специфических лабораторных реактивов и материалов. Условия для компетентной идентификации грибов-оппортунистов имеются в специализированных микологических лабораториях. Заключительный (и необходимый) этап микологического исследования – определение чувствительности возбудителя к набору антифунгальных препаратов. Ввиду отсутствия вакцин против оппортунистических микозов, фармацевтические антимикотики незаменимы для терапии ОМ. К сожалению, в настоящее время ветеринария ощущает острую нехватку этих средств, что вынуждает врачей прибегать к дорогостоящим медицинским препаратам, чьё действие на различные виды животных недостаточно изучено.
В заключении по результатам микологического анализа целесообразно не только указать вид обнаруженного гриба-оппортуниста, но и пояснить его этиологическую роль (например, инфекция, аномальная колонизация, нормальная колонизация, контаминация). Это позволит врачу назначить адекватное лечение, с учетом общей картины заболевания животного. Так, если в первых двух случаях показана антифунгальная терапия, то в третьем и четвертом она будет нецелесообразна.
Оппортунистические микозы, еще недавно неизвестные в широкой ветеринарной практике, в настоящее время заняли место в группе наиболее распространенных инфекционных заболеваний животных. Оказание надлежащей ветеринарной помощи при ОМ невозможно без проведения квалифицированного лабораторного диагностического исследования.
